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http://hdl.handle.net/2445/35990
Full metadata record
DC Field | Value | Language |
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dc.contributor.advisor | Lozano Soto, Francisco | - |
dc.contributor.advisor | Enrich Bastús, Carles | - |
dc.contributor.author | Vilà de las Heras, Josep M. | - |
dc.contributor.other | Universitat de Barcelona. Departament de Biologia Cel·lular i Anatomia Patològica | - |
dc.date.accessioned | 2013-04-24T13:28:20Z | - |
dc.date.available | 2013-04-24T13:28:20Z | - |
dc.date.issued | 2001-12-11 | - |
dc.identifier.isbn | 8469987518 | - |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/2445/35990 | - |
dc.description.abstract | [spa] El receptor linfocitario CD5 es una glicoproteína monomérica de membrana de 67KDa. Funcionalmente, es una molécula accesoria, implicada en la modulación de los procesos de activación y diferenciación mediados por el receptor antigénico en células T y B. Su región citoplasmática no contiene ninguna actividad catalítica intrínseca, pero en cambio presenta diversos motivos potenciales de fosforilación para serin/treonin y tirosincinasas, y otros motivos estructurales compatibles con una función señalizadora intracelular. Se ha demostrado que esta región se encuentra constitutivamente fosforilada por CKII en las serinas carboxiterminales S458, S459 y S461, y es rápidamente hiperfosforilada en residuos serina, treonina y/o tirosina tras la activación linfocitaria inducida por agentes tales como PMA, anti-CD3, o anti-CD5 mAbs. Creemos que los ciclos de fosforilación-defosforilación podrían estar implicados en la regulación de la actividad y la función de CD5. De acuerdo con esta hipótesis nos planteamos el estudio de los mecanismos de fosforilación implicados en la señalización intracelular de CD5: - Mediante la técnica del yeast two-hybrid y ensayos de co-precipitación, demostramos la existencia de una interacción específica entre la subunidad reguladora ? de CKII y la región C-terminal de CD5 donde se localizan las serinas antes mencionadas. - Utilizando PMA como estímulo, identificamos dos residuos treonina (T410 y T412) como responsables de la fosforilación in vivo de CD5 por la serin/treonincinasa PKC. Estudios funcionales posteriores demostraron que la integridad de T410 y T412 es crítica para la activación mediada por CD5 de la fosfolipasa C específica de fosfatidilcolina (PC-PLC) y para la inhibición por ésteres de forbol de la internalización de CD5 mediada por anticuerpo. - Tras la estimulación con mAb anti-CD3 o pervanadato, los residuos Y429 e Y463, y no Y378 e Y463, son dianas únicas para tirosinacinasas. Se obtuvieron los mismos resultados en ensayos de fosforilación in vitro utilizando productos recombinantes purificados de las tirosincinasas Lck y Fyn. El análisis de células Jurkat deficientes en Lck y CD3 demostró además que la tirosinfosforilación de CD5 requiere la actividad Lck. - Demostramos la fosforilación y posterior asociación de las proteínas adaptadoras c-Cbl y LAT a Grb2 vía CD5. Los niveles de fosforilación de c-Cbl vía CD5 son similares a los inducidos vía CD3 y no se afectan por la deleción de 2/3 C-terminales de la región citoplasmática de CD5. Por el contrario, la fosforilación de LAT (36-38 kDa) vía CD5 es muy débil comparada con la inducida vía CD3. - Demostramos que la asociación de una actividad serin/treonincinasa, anteriormente identificada en los inmunoprecipitados de CD5 es específica y se localiza en su región citoplasmática proximal a la membrana. Además, demostramos que los sitios diana para la cinasa se encuentran en esta región, así como a lo largo de toda la cola citoplasmática. En conclusión, CD5 tiene una región citoplasmática adaptada para transducir señales intracelulares y nuestros resultados demuestran que los procesos de fosforilación juegan un papel muy relevante en ello. 1. La asociación de CKII? a CD5 apoya la fosforilación constitutiva de CD5 por esta cinasa, la cual es necesaria para la activación de la cascada enzimática PC-PLC/A-SMasa. 2. La fosforilación inducible de CD5 por PKC sobre los residuos T410 y T412 es crítica para la regulación de aspectos funcionales de la molécula, como la activación de la cascada enzimática PC-PLC/A-SMasa y la internalización de la molécula. 3. La fosforilación inducible de CD5 por PTK únicamente sobre las tirosinas Y429 e Y463, invalida la funcionalidad de los motivos ITAM-like e ITIM-like presentes en CD5. 4. CD5 activa una vía de señalización propia que incluye la tirosin-fosforilación de c-Cbl y LAT, la activación de una serin/treonincinasa todavía por identificar y su internalización mediada por clatrina. | cat |
dc.format.mimetype | application/pdf | - |
dc.language.iso | spa | - |
dc.publisher | Universitat de Barcelona | - |
dc.rights | (c) Vilà de las Heras, 2001 | - |
dc.source | Tesis Doctorals - Departament - Biologia Cel·lular i Anatomia Patològica | - |
dc.subject.classification | Antigen CD5 | - |
dc.subject.classification | Transformació limfocítica | - |
dc.subject.classification | Proteïnes quinases | - |
dc.subject.classification | Cèl·lules T | - |
dc.subject.classification | Cèl·lules B | - |
dc.subject.classification | Transducció de senyal cel·lular | - |
dc.subject.classification | Fosforilació | - |
dc.subject.other | Protein kinases | - |
dc.subject.other | T cells | - |
dc.subject.other | B cells | - |
dc.subject.other | Cellular signal transduction | - |
dc.subject.other | Phosphorylation | - |
dc.subject.other | CD5 antigen | - |
dc.subject.other | Lymphocyte transformation | - |
dc.title | Cinasas intracelulares y señalización mediada por CD5 | spa |
dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | - |
dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | - |
dc.identifier.dl | B.31185-2002 | - |
dc.rights.accessRights | info:eu-repo/semantics/openAccess | cat |
dc.identifier.tdx | http://www.tdx.cat/TDX-0528102-091849 | - |
dc.identifier.tdx | http://hdl.handle.net/10803/853 | - |
Appears in Collections: | Tesis Doctorals - Departament - Biologia Cel·lular i Anatomia Patològica |
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