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Factor de transcripción ACII ("Activator of Class II"), El. Formas proteicas, estructura y unión al ADN.

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Universitat de Barcelona. Departament de Fisiologia (Biologia)

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Las principales funciones del sistema inmunitario son: el reconocimiento de lo propio frente a lo extraño, la eliminación de lo extraño y la reparación de los tejidos dañados. En los macrófagos, los Ags son fagocitados y degradados en péptidos lineales más pequeños que serán presentados por las moléculas de clase II del MHC (Complejo Mayor de Histocompatibilidad) y son reconocidos por las moléculas del denominado TCR (receptor de las células T). Las moléculas del MHC de clase II se expresan en un reducido número de tipos celulares y estos se pueden dividir en dos grupos principales: aquellos que expresan estas moléculas de una forma constitutiva como son los linfocitos B y las células dendríticas, y aquellas que expresan las moléculas de clase II tras la estimulación con IFN-gamma como son los macrófagos, los fibroblastos y las células tímicas epiteliales. En todos los promotores de los diferentes genes de clase II tanto en humanos como en ratón se pueden encontrar en situación cis una serie de elementos comunes: En la región proximal se encuentran 3 elementos reguladores denominados W, X e Y cuya orientación, posiciones relativas y distancia entre sí están conservadas en todos los genes de clase II, tanto en las cadenas alpha como beta, y en todas las especies examinadas. Esto también es así también para la cadena invariante aunque se encuentra codificada en otro cromosoma diferente al de los genes del MHC. En la región distal contiene los mismos elementos reguladores que la región proximal pero en sentido inverso actuando como región represora. La regulación de los genes de clase II del MHC es mayoritariamente transcripcional aunque también existe una regulación a nivel traduccional. El factor que determina la expresión específica de las moléculas de clase II es el CIITA por activador transcripcional de clase II. El CIITA es un transactivador que no interacciona directamente con el ADN pero si con los factores constitutivos, con la maquinaria general de transcripción y con factores implicados en el remodelado del ADN. La expresión del factor CIITA está regulada por el uso de diferentes regiones promotoras. Quedan por definir todas las proteínas que intervendrían en la especificidad e inducibilidad del CIITA. En nuestro grupo una de la líneas de investigación es la del estudio de la regulación de la expresión de las moléculas de clase II. Mediante el rastreo de una genoteca murina de expresión con una sonda que contenía la secuencia de la caja X del gen IA beta nuestro grupo clonó un factor denominado ACII por activador de clase II que pensamos está implicado en la regulación de los genes de clase II. El factor ACII presenta una localización nuclear y en los tipos celulares que expresan ACII, observamos el mismo patrón de cuatro formas proteícas y en ningún caso detectamos la forma proteica de 42.3 KDa que solamente la detectamos in vitro. Por lo que la forma de hACII.2 se corresponde con un mRNA no procesado mientras que hACII.1 sufre un procesamiento de 320 nt similar al caso murino donde se eliminan 260 nt. Se ha identificado el dominio hélice-giro-hélice de ACII como responsable de la unión al ADN. Además existen tres dominios LRR y un dominio rico en prolina que podrían mediar interacciones de tipo proteína-proteína. Mediante la utilización de diversas estrategias no hemos identificado ninguna proteína con la suficiente similitud con ACII para formar parte de una misma familia de factores de transcripción y mediante la técnica de la PCR-SITE SELECTION se ha identificado el motivo ACAA como el más afín en la unión al ADN del Factor ACII.

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Tesis Doctorals - Departament - Fisiologia (Biologia)

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Factor de transcripción ACII ("Activator of Class II"), El. Formas proteicas, estructura y unión al ADN.