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Diagnóstico y vigilancia de las infecciones por arbovirus

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Universitat de Barcelona. Departament de Fonaments Clínics

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[spa] INTRODUCCIÓN:
Los arbovirus son un grupo heterogéneo de virus transmitidos por vectores artrópodos. Entre ellos destacan los virus dengue (VDEN), chikungunya (VCHIK) y Zika (VZIK), que presentan similitudes en cuanto a su distribución geográfica, vectores transmisores y cuadro clínico que ocasionan. Existe un alto riesgo de emergencia y re-emergencia de los mismos debido, entre otros, al gran número de viajeros entre zonas endémicas y no endémicas y a la expansión de diferentes vectores. Unas técnicas diagnósticas fiables y rápidas son de vital importancia para hacer frente a este riesgo.  
HIPÓTESIS Y OBJETIVOS:
Una evaluación rigurosa de diferentes métodos diagnósticos y de la cinética de los marcadores de infección permitirá la creación de algoritmos diagnósticos que mejoren el diagnóstico de las arbovirosis. La revisión de los resultados obtenidos por los protocolos vigentes permitirá estimar el riesgo de infección y afectación fetal por VZIK en embarazadas. 
Los objetivos de este trabajo son: estudiar la cinética de la infección por VZIK, evaluar el cribado serológico de VZIK llevado a cabo en embarazadas en Cataluña, analizar la utilidad de los parámetros analíticos para orientar el diagnóstico del síndrome febril en viajeros, evaluar el rendimiento de un nuevo ensayo de inmuno-aglutinación magnética (IMA) para detectar antígeno NS1 de VDEN e investigar la utilidad de otras técnicas serológicas para el diagnóstico de las infecciones por VDEN, VCHIK y VZIK. 
MATERIAL Y MÉTODOS :
Se estudió la presencia de VZIK en muestras de suero y orina de 24 pacientes con infección por VZIK mediante RT-PCR en tiempo real. Se investigó la presencia de VZIK en semen en un paciente mediante métodos moleculares y cultivo celular utilizando muestras seriadas. Se evaluaron los resultados del cribado de VZIK y el impacto sobre el embarazo en 1.057 gestantes cribadas para VZIK en Cataluña en 2016. Se estudiaron los valores de plaquetas y leucocitos en 1.218 viajeros provenientes del trópico para determinar la utilidad de la plaquetopenia y leucopenia en el diagnóstico de malaria y arbovirosis. Se estudió el rendimiento diagnóstico de un método de IMA para detectar antígeno NS1 de VDEN en un panel de 135 muestras que incluía los cuatro serotipos de VDEN, y se comparó con las técnicas de ELISA e inmunocromatografía (ICT). También se exploró la utilidad diagnóstica de un test rápido de dengue, de un ELISA basado en la proteína NS1 de VZIK para detectar anticuerpos y de un ensayo de inmunoblot para diferenciar infecciones por VDEN, VZIK y VCHIK, comparando los resultados con los de las técnicas diagnósticas de rutina. 
RESULTADOS PRINCIPALES :
Se detectó la presencia del VZIK por RT-PCR en tiempo real en muestras de suero y orina fuera de los períodos considerados óptimos en aquel momento por las recomendaciones de organismos internacionales.  
Se detectó la presencia de ARN de VZIK en semen 93 días desde el inicio de los síntomas, sin poder aislar el virus en cultivo celular.  
Los datos del cribado serológico de VZIK de 1.057 embarazadas en Cataluña mostraron un 13,4% de gestantes con alguna evidencia serológica de infección por VZIK, siendo la prevalencia de efectos fetales adversos (aborto o microcefalia) del 3,1%.   
La leucopenia (<4x109 leucocitos/L) y la trombocitopenia (<150x109 plaquetas/L) mostraron un valor predictivo negativo del 98,1% para el diagnóstico de arbovirosis y malaria respectivamente, en viajeros con síndrome febril a la vuelta de un viaje al trópico. 
El ensayo de IMA para detectar NS1 de VDEN mostró una elevada sensibilidad 
(91,9%) y especificidad (98,4%), comparables a la técnica de ELISA pero obteniendo los resultados de forma tan rápida como una ICT. 
El test rápido para VDEN basado en ICT mostró un la detección de IgM frente al virus.  
La técnica de ELISA para la detección de IgG utilizando como antígeno NS1 de VZIK mostró una sensibilidad del 92,9% y una especificidad del 87,0% comparándola con el ensayo de microneutralización. 
El ensayo basado en inmunoblot mostró una baja sensibilidad (<40%) para la detección de IgM frente a VDEN, VZIK y VCHIK.  
CONCLUSIONES:
El testado simultáneo de suero y orina mediante métodos moleculares aumenta el rendimiento diagnóstico para la detección de infecciones por VZIK. El VZIK puede persistir en semen durante periodos prolongados de tiempo. La frecuencia de desenlaces adversos por VZIK en embarazadas atendidas en Cataluña fue similar a la descrita en la literatura en algunas zonas endémicas. Los valores de leucocitos y plaquetas pueden ayudar en el despistaje clínico inicial de pacientes con fiebre a la vuelta de un viaje al trópico. El ensayo de IMA es una herramienta útil para el diagnóstico rápido de dengue agudo. La evaluación de nuevas técnicas diagnósticas para arbovirosis es necesaria para determinar su utilidad a fin de intentar solucionar las limitaciones del diagnóstico serológico.

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cc by-nc-sa (c) Alejo Cancho, Izaskun, 2023

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Tesis Doctorals - Departament - Fonaments Clínics

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Diagnóstico y vigilancia de las infecciones por arbovirus