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Flujo mesentérico en un modelo experimental de enterocolitis necrotizante por isquemia - reperfusión en ratas

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Universitat de Barcelona. Departament d'Obstetrícia i Ginecologia, Pediatria i Radiologia i Medicina Física

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[spa] INTRODUCCIÓN. La enterocolitis necrotizante (ECN) es una enfermedad digestiva neonatal grave, multifactorial y de etiología diversa, caracterizada por inflamación e isquemia del intestino delgado y colon que progresa hacia la necrosis transmural y perforación. La prevalencia se sitúa alrededor de uno a tres por cada mil recién nacidos vivos siendo mayor en prematuros con un peso inferior a 1500 gramos (g), es decir de muy bajo peso al nacer. HIPÓTESIS. Los cambios de flujo mesentérico medidos por Ecografía Doppler color tienen correlación con las lesiones intestinales macroscópicas y microscópicas en un modelo experimental de ECN. MATERIAL Y MÉTODO. Se estudiaron 2 grupos de 10 (control: 1 / isquemia: 2) y un grupo de 16 (reperfusión: 3) ratas (Sprague-Dawley) de ambos sexos de 17 días de vida con un peso promedio de 21 a 36 g. Las variables ecográficas a comparar fueron: velocidad sistólica máxima (VSM), velocidad media (Vm), flujo diastólico (FD), pico de flujo diastólico reverso (PFDR), índice de pulsatilidad (IP), índice de resistencia (IR) y proporción o índice sístole/diástole (S/D). Las variables de histología a comparar fueron: lesión intestinal (escala de Wallace/Keenan/ Chiu delgado), altura media de vellosidades (AMV), hipertrofia glandular, células caliciformes y mitosis. El modelo de isquemia-reperfusión consiste en clampar la arteria mesentérica superior en su raíz por 60 minutos (grupo 2) y reperfundir por 24 horas (grupo 3). La ecografía intra-abdominal se practico en los grupos 1, 2 y 3 previo al sacrificio. Tras la necropsia se procede a identificar el intestino delgado y grueso para tomar biopsias, las mismas que serán procesadas en hematoxilina-eosina para su estudio microscópico. El estudio descriptivo fue expresado en mediana (rangos). De los resultados significativos a la Prueba de Kruskal-Wallis se realizó la comparación mediante la Prueba U-Mann-Whiney y la correlación de rangos de Sperman. Posteriormente en el caso de encontrar una correlación significativa se realizó el estudio de regresión no lineal. Consideramos significativo una p<0,01. RESULTADOS. Las variables ecográficas y de anatomía patológica que tienen un grado de asociación significativo (p<0,01) fueron: la VSM, el IP y S/D (ecografía Doppler color) señalando una relación con la escala de Wallace/Keenan, promedio de Chiu en el intestino delgado, AMV, hipertrofia glandular del intestino grueso y células caliciformes del intestino grueso. El grupo 3 comparado con los grupos 1 y 2, la VSM, IP y S/D encontró 5 asociaciones significativas (p<0,01) las cuales guardan relación con escala macroscópica de Wallace/Keenan, la escala microscópica de Chiu delgado, la AMV el porcentaje de hipertrofia glandular del intestino grueso y el número de células caliciformes de intestino grueso. CONCLUSIONES. El modelo de isquemia - reperfusión intestinal en la rata de 17 días de vida logra unas lesiones histopatológicas similares a las de la enterocolitis necrotizante descritas en el recién nacido humano. La velocidad sistólica máxima (VSM) y los índices de resistencia vascular (pulsatilidad [IP] - sístole/diástole [S/D]) medidos por Ecografía Doppler color en la arteria mesentérica superior de rata neonata se encuentran aumentados en la ECN. Existe una correlación directa entre la VSM, el IP y S/D y el grado de lesión intestinal macroscópico (Wallace/Keenan) y microscópico (Chiu). Existe una correlación inversa entre la VSM, el IP y S/D y la altura media de vellosidades (AMV). Existe una correlación directa entre la VSM, el IP y S/D y la hipertrofia glandular en el colon. Existe una correlación inversa entre la VSM, el IP y S/D y el número de células caliciformes del colon. PALABRAS CLAVE: Flujo mesentérico, Ecografía Doppler, Rata neonata, Isquemia - Reperfusión, ECN.

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[eng] INTRODUCTION. Enterocolitis Necrotizing (NEC) is a digestive disease neonatal severe multifactorial and diverse etiology, characterized by inflammation and ischemia of the small intestine and colon progresses towards transmural necrosis and perforation. Prevalence is around one to three per every 1,000 newly births being greater in preterm infants weighing less than 1500 grams (g), is of very low birth. HYPOTHESIS. Mesenteric workflow changes by Doppler ultrasound color have correlation with intestinal macroscopic and microscopic lesions in an experimental model of ECN. MATERIALS AND METHODS. Studied two groups of 10 (control: 1 / ischemia: 2) and a group of 16 (reperfusion: 3) rats (Sprague-Dawley) 17 days with an average weight of 21 to 36 g boys. The variable ultrasound to compare were: maximum systolic velocity (MSV), average velocity (Va), diastolic flow (DF), peak reverse diastolic flow (PRDF), pulsatility index (PI), index of resistance (RI) and proportion or index systole/diastole (S/D). Histology to compare variables was: intestinal lesion (Wallace/Keenan scale/thin Chiu), average villous height (AVH), glandular hypertrophic and goblet cell mitosis. Ischemia-reperfusion model clamp is superior in its root mesenteric artery by 60 minutes (Group 2) and 24 hours for reperfusion (Group 3). Intra-abdominal ultrasound practical groups (1, 2 and 3) prior to slaughter. After the post mortem is identifying thin and thick bowel to take biopsies, they will be processed in hematoxilina-eosina for microscopic examination. The descriptive study was expressed in median (ranges). The significant results to the test of Kruskal - Wallis was using test U-Mann-Whiney comparison and correlation of Sperman ranges. Later in the case of finding a significant correlation was the study of nonlinear regression. We consider significant p<0,01. RESULTED. The variable sonogram and pathological anatomy that have a significant degree of Association (p<0,01) were: the MSV, the PI and S/D (Doppler ultrasound color) by pointing out a relationship with the scale of Wallace/Keenan, average Chiu in the small intestine, AVH, glandular hypertrophic of the large intestine and goblet cells of the large intestine. Group 3 compared groups 1 and 2, the VSM, IP and S/D found 5 significant associations (p<0,01) which relate to macroscopic scale of Wallace/Keenan, the microscopic scale of thin Chiu, the percentage of glandular hyperplasia of the large intestine AVH and number of goblet colon cells. CONCLUSIONS. Ischemia - reperfusion intestinal rat 17 days of life model achieves a similar to the of the Necrotizing enterocolitis described in the newborn human histopathological lesions. Systolic velocity (MSV) and vascular resistance rates (pulsatility [PI] - systole/diastole [S/D]) by Doppler ultrasound color in the superior mesenteric artery neonatal rat are increased in the NEC. There is a direct correlation between the MSV, the PI and S/D and the degree of intestinal lesion macroscopic (Wallace/Keenan) and microscopic (Chiu). There is an inverse correlation between the MSV, the PI and S/D and the average villous height (AVH). There is a direct correlation between the MSV, the PI and S/D and glandular hypertrophic in the colon. There is an inverse correlation between the MSV, the PI and S/D and the number of goblet colon cells. KEY WORD: mesenteric flow, ultrasound Doppler, Neonatal rat, Ischemia - Reperfusion, NEC.

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Tesis Doctorals - Departament - Obstetrícia i Ginecologia, Pediatria i Radiologia i Medicina Física

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Flujo mesentérico en un modelo experimental de enterocolitis necrotizante por isquemia - reperfusión en ratas