# name
Nuevos modelos murinos para investigar la desregulación molecular por pérdida de Tet2 en la hematopoyesis y el envejecimiento

# metadata.dc.contributor.other[].value
Universitat de Barcelona. Facultat de Medicina i Ciències de la Salut

# metadata.dc.description.abstract[].value
[spa] Las células madre hematopoyéticas (HSCs) poseen la capacidad de autorrenovarse y diferenciarse, garantizando así el mantenimiento del sistema hematopoyético a lo largo de la vida del individuo. Sin embargo, con el envejecimiento, la acumulación de mutaciones somáticas puede conferir a las HSCs mutadas una ventaja proliferativa, dando lugar a su expansión clonal, un fenómeno conocido como hematopoyesis clonal (CH). Entre los genes recurrentemente mutados en la CH y en las neoplasias hematológicas, TET2 destaca como uno de los más relevantes. No obstante, los mecanismos moleculares que impulsan la CH asociada a TET2 aún no se comprenden completamente. En este estudio, hemos generado y caracterizado dos nuevos modelos murinos con una deleción inducible de Tet2: Tet2f/f:Lyz2-CreERT2, dirigido a células mieloides maduras, y Tet2f/f:Scl-CreERT2, enfocado en las HSCs. El primero mostró una pérdida eficiente de Tet2 en las células mieloides del bazo, acompañada de alteraciones epigenéticas relevantes relacionadas con la inflamación. El segundo modelo permitió analizar con mayor precisión las consecuencias de la deleción de Tet2 en etapas tempranas de la hematopoyesis, detectándose alteraciones transcripcionales y epigenéticas en genes asociados con la autorrenovación y la transformación maligna, sin observarse cambios fenotípicos evidentes a corto plazo. Además, se realizó una caracterización exhaustiva del sistema Mx1-Cre, ampliamente utilizado para estudiar la pérdida de Tet2 en ratones. Tanto en animales jóvenes como envejecidos, la pérdida de Tet2 provocó un aumento en la autorrenovación de las células madre y progenitoras hematopoyéticas (HSPCs), así como una expansión del linaje mieloide. Estas alteraciones se acompañaron de cambios generalizados en la metilación del ADN y en la expresión de genes relacionados con la respuesta inmune en las HSPCs. Sin embargo, este modelo presenta importantes limitaciones, como la deleción de Tet2 en múltiples tipos celulares, la activación inflamatoria y la recombinación espontánea, que dificultan la interpretación del papel específico de Tet2.

# metadata.dc.description.abstract[].value
[cat] Les cèl·lules mare hematopoètiques (HSCs) tenen la capacitat d’autorrenovar-se i diferenciar-se, garantint així el manteniment del sistema hematopoètic al llarg de la vida de l’individu. No obstant això, amb l’envelliment, l’acumulació de mutacions somàtiques por conferir a les HSCs mutades un avantatge proliferatiu, donant lloc a la seva expansió clonal, un fenomen conegut com hematopoesi clonal (CH). Entre els gens mutats de manera recurrent en la CH i en les neoplàsies hematològiques, TET2 destaca com un dels més rellevants. Tanmateix, els mecanismes moleculars que impulsen la CH associada a TET2 encara no es comprenen completament. En aquest estudi, hem generat i caracteritzat dos nous models murins amb una deleció induïble de Tet2: Tet2f/f:Lyz2-CreERT2, dirigit a les cèl·lules mieloides madures, i Tet2f/f:Scl-CreERT2, enfocat en les HSCs. El primer va mostrar un pèrdua eficient de Tet2 en les cèl·lules mieloides de la melsa, acompanyada d’alteracions epigenètiques rellevants relacionades amb la inflamació. El segon model va permetre analitzar amb més precisió les conseqüències de la deleció de Tet2 en etapes inicials de l’hematopoesi, detectant-se alteracions transcripcionals i epigenètiques en gens associats amb l’autorrenovació i la transformació maligna, sense observar-se canvis fenotípics evidents a curt termini. A més, vam dur a terme una caracterització exhaustiva del sistema Mx1-Cre, àmpliament utilitzat per estudiar la pèrdua de Tet2 en ratolins. Tant en animals joves com envellits, la pèrdua de Tet2 va provocar un augment de l’autorrenovació de les cèl·lules mare i progenitores hematopoètiques (HSPCs), així com una expansió del llinatge mieloide. Aquestes alteracions es van acompanyar de canvis generalitzats en la metilació de l’ADN i en l’expressió de gens relacionats amb la resposta immune en les HSPCs. No obstant això, aquest model presenta limitacions importants, com la deleció de Tet2 en múltiples tipus cel·lulars, l’activació inflamatòria i la recombinació espontània, que dificulten la interpretació del paper específic de Tet2. En conjunt, els nous models desenvolupats en aquest treball representen eines complementàries i més precises per a l’estudi de la CH i la transformació maligna, facilitant l’anàlisi dels seus mecanismes cel·lulars i moleculars, així com l’avaluació preclínica de teràpies dirigides.

# metadata.dc.description.abstract[].value
[eng] Hematopoietic stem cells (HSCs) possess the ability to self-renew and differentiate, thereby ensuring the maintenance of the hematopoietic system throughout an individual’s lifespan. However, with aging, the accumulation of somatic mutations can confer a proliferative advantage to mutated HSCs, leading to their clonal expansion. This phenomenon is known as clonal hematopoiesis (CH). Among the genes recurrently mutated in CH and hematological malignancies, TET2 stands out as one of the most relevant. Nevertheless, the molecular mechanisms driving TET2-associated CH are not yet fully understood. In this study, we generated and characterized two novel mouse models with an inducible Tet2 deletion: Tet2f/f:Lyz2-CreERT2, targeting mature myeloid cells, and Tet2f/f:Scl-CreERT2, focused on HSCs. The first model showed efficient loss of Tet2 in splenic myeloid cells, along with relevant epigenetic changes related with inflammation. The second model enabled a more precise analysis of the consequences of Tet2 deletion at early hematopoietic stages, revealing transcriptional and epigenetic alterations in genes related to self-renewal and malignant transformation, without evident short-term phenotypic changes. We also performed a comprehensive characterization of the widely used Mx1-Cre system to study Tet2 loss in mice. In both young and aged animals, Tet2 deletion led to increased self-renewal of hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs), as well as myeloid lineage expansion. These changes were accompanied by widespread alterations in DNA methylation and expression of immune-related genes in HSPCs. However, this model presents significant limitations, including Tet2 deletion in multiple cell types, inflammatory activation, and spontaneous recombination, which complicate the interpretation of Tet2-specific roles. Altogether, the new models developed in this study represent complementary and more refined tools to investigate CH and malignant transformation, facilitating the analysis of underlying cellular and molecular mechanisms and the preclinical evaluation of targeted therapies.

# metadata.dc.source[].value
Tesis Doctorals - Facultat - Medicina i Ciències de la Salut

# metadata.dc.title[].value
Nuevos modelos murinos para investigar la desregulación molecular por pérdida de Tet2 en la hematopoyesis y el envejecimiento