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Genotipificación de Trypanosoma cruzi en pacientes con enfermedad de Chagas - megacolon

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Universitat de Barcelona. Facultat de Medicina i Ciències de la Salut

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[spa] La enfermedad de Chagas (EC) es causada por el protozoario Trypanosoma cruzi, y afecta a 6- 7 millones de personas en 21 países de América. La EC tiene diferentes formas de transmisión, siendo la vectorial y la vertical las más frecuentes. Entre las principales complicaciones de la enfermedad figuran las afectaciones cardíacas, que afectan a un 30%-35% de afectados y las digestivas, que afectan a un 10%-20% de personas con la infección por T. cruzi. Los síntomas crónicos de la enfermedad aparecen décadas después de la infección. En 2009, un consenso internacional clasificó las cepas de T. cruzi en seis unidades discretas de tipificación (UDT): TcI a TcVI. Las infecciones mixtas son muy frecuentes. La capacidad infectiva, el tropismo tisular variable y la sensibilidad al tratamiento antiparasitario son atribuidos a la variabilidad genética y al gran polimorfismo que exhiben los clones del parásito.
El objetivo de este trabajo es caracterizar las UDT de T. cruzi en muestras de sangre y tejido de 40 pacientes con afección digestiva (megacolon) que se sometieron a resección del segmento afectado por un procedimiento quirúrgico en centros especializados de Cochabamba (Bolivia), utilizando nuevos protocolos de procesado y detección.
En concreto, se utilizaron estrategias para favorecer la solubilidad y la homogeneización de las capas mucosas del tejido intestinal y poder extraer fácilmente el ADN de los mismos. Se utilizó PCR en tiempo real cuantitativa para la detección, amplificación, y caracterización molecular de T. cruzi, dirigida al ADN satelital. La identificación de los UDTs de T. cruzi fue realizada por PCR basado en la amplificación de los objetivos SL-IRac, SL-IR I y II, 24Sα rDNA y A10 mediante PCRs convencionales multilocus que permitieron el análisis directo en las muestras clínicas de las poblaciones parasitarias naturales.
Los resultados encontrados revelaron la presencia de T. cruzi en muestras de sangre y tejido colónico, con un predominio de los UDTs TcII y TcV. La UDT TcVI solo se identificó en muestras de sangre.

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Tesis Doctorals - Facultat - Medicina i Ciències de la Salut

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Genotipificación de Trypanosoma cruzi en pacientes con enfermedad de Chagas - megacolon