Embargament
Document embargat fins el 2026-12-03Tipus de document
TesiVersió
Versió publicadaData de publicació
Llicència de publicació
Si us plau utilitzeu sempre aquest identificador per citar o enllaçar aquest document: https://hdl.handle.net/2445/230433
Exploring Non-Canonical Roles of the Branching Microtubule Nucleator Augmin
Títol de la revista
Autors
Director/Tutor
Contribució addicional
ISSN de la revista
Títol del volum
Resum
[eng] Augmin recruits the microtubule nucleator γTuRC to mediate branching nucleation from the lattice of pre-existing microtubules. Through this mechanism, augmin not only amplifies microtubule number, but also reinforces pre-existing microtubule polarity, which is vital for bipolar mitotic spindle assembly. Previous work has demonstrated also non-mitotic roles of augmin, for example in plant interphase cells and in post-mitotic neurons. Moreover, our group recently discovered a novel role in the centriole lumen, where augmin is recruited during S phase. Here, rather than mediating branching nucleation, augmin may promote centriole integrity. In this thesis I aim to gain further insight into non-mitotic functions of augmin. To achieve that I have knocked-in a degradation tag into the HAUS6 gene, which allows specific inactivation of augmin during interphase, in the absence of confounding mitotic defects. Using this model, I found that nascent daughter centrioles lacking luminal augmin display structural defects and remain shorter than controls, owing to defective elongation of the central part of the centriole cylinder, whereas the distal part remains unaffected. Interestingly, γTuRC is recruited by augmin to the centriole lumen, but only after mitosis, suggesting no direct involvement of luminal γTuRC in centriole biogenesis. I also analyzed interphase cytoplasmic nucleation activity, which seems largely unaffected by the loss of augmin. Strikingly, upon elimination of centrosomes, interphase nucleation becomes augmin-dependent. We propose that in addition to its well-established mitotic function, during interphase augmin ensures correct centriole biogenesis and promotes nucleation of microtubules, in particular in cells with attenuated centrosome activity.
[cat] Augmin recluta el nucleador de microtúbuls γTuRC per mediar la nucleació ramificada a partir de la matriu de microtúbuls preexistents. Mitjançant aquest mecanisme, augmin no només amplifica el nombre de microtúbuls, sinó que també reforça la polaritat dels microtúbuls preexistents, la qual cosa és vital per a l'acoblament del fus mitòtic. Treballs previs han demostrat també funcions no mitòtiques d'augmin, per exemple en cèl·lules vegetals en interfase i en neurones postmitòtiques. A més, el nostre grup va descobrir recentment un nou paper al lumen del centríol, on augmin es recluta durant la fase S. En aquest cas, en lloc de mediar la nucleació ramificada, augmin podria promoure la integritat del centríol. En aquesta tesi, l'objectiu és aprofundir en les funcions no mitòtiques d'augmin. Per aconseguir-ho, he introduït mitjançant knock-in un tag de degradació al gen HAUS6, cosa que permet la inactivació específica d'augmin durant la interfase, en absència de defectes mitòtics. Utilitzant aquest model, vaig trobar que els centríols fills naixents que no tenen augmin al lumen presenten defectes estructurals i romanen més curts que els controls, a causa d'una elongació defectuosa de la part central del cilindre centríolar, mentre que la part distal roman inalterada. Curiosament, γTuRC és reclutat per augmin al lumen del centríol, però només després de la mitosi, cosa que suggereix que no hi ha una implicació directa de γTuRC luminal en la biogènesi del centríol. També vaig analitzar l'activitat de nucleació de microtúbuls en interfase, que sembla que no es veu gaire afectada per la pèrdua d'augmin. Sorprenentment, després de l'eliminació dels centrosomes, la nucleació en interfase esdevé dependent d'augmin. Proposem que, a més de la seva funció mitòtica ben establerta, durant la interfase augmin assegura la biogènesi correcta del centríol i promou la nucleació de microtúbuls, en particular en cèl·lules amb activitat atenuada del centrosoma.
[esp] Augmin media la nucleación por ramificación de microtúbulos a través del reclutamiento del nucleador γTuRC a la pared de los microtúbulos para generar otros nuevos. A través de este mecanismo, augmin no solo amplifica el número de microtúbulos, sino que también refuerza la polaridad de los microtúbulos preexistentes, lo cual es vital para el ensamblaje del huso mitótico. Trabajos previos también han demostrado funciones no mitóticas de augmin, por ejemplo, en células vegetales durante la interfase y en neuronas postmitóticas. Además, nuestro grupo descubrió recientemente un nuevo papel en el lumen del centriolo, donde augmin es reclutado durante la fase S. En este contexto, en lugar de mediar la nucleación por ramificación, augmin podría promover la integridad del centriolo. En esta tesis, mi objetivo es obtener una mayor comprensión de las funciones no mitóticas de augmin. Para lograrlo, he introducido mediante knock-in una etiqueta de degradación en el gen HAUS6, lo que permite la inactivación específica de augmin durante la interfase, en ausencia de defectos mitóticos. Utilizando este modelo, he descubierto que los centriolos hijos nacientes que carecen de augmin en el lumen muestran defectos estructurales y son más cortos que los centriolos control, debido a una elongación defectuosa de la parte central del centriolo, mientras que la parte distal no se ve afectada. Curiosamente, γTuRC es reclutado por augmin al lumen del centriolo, pero solo después de la mitosis, lo que sugiere que no hay una implicación directa del γTuRC luminal en la biogénesis del centriolo. También he analizado la actividad de nucleación de microtúbulos durante la interfase, que parece no verse afectada en gran medida por la pérdida de augmin. Sorprendentemente, tras la eliminación de los centrosomas, la nucleación en interfase se vuelve dependiente de augmin. En esta tesis propongo que, además de su función mitótica bien establecida, durante la interfase augmin asegura la biogénesis correcta del centriolo y promueve la nucleación de microtúbulos, en particular en células con una actividad atenuada del centrosoma.
[cat] Augmin recluta el nucleador de microtúbuls γTuRC per mediar la nucleació ramificada a partir de la matriu de microtúbuls preexistents. Mitjançant aquest mecanisme, augmin no només amplifica el nombre de microtúbuls, sinó que també reforça la polaritat dels microtúbuls preexistents, la qual cosa és vital per a l'acoblament del fus mitòtic. Treballs previs han demostrat també funcions no mitòtiques d'augmin, per exemple en cèl·lules vegetals en interfase i en neurones postmitòtiques. A més, el nostre grup va descobrir recentment un nou paper al lumen del centríol, on augmin es recluta durant la fase S. En aquest cas, en lloc de mediar la nucleació ramificada, augmin podria promoure la integritat del centríol. En aquesta tesi, l'objectiu és aprofundir en les funcions no mitòtiques d'augmin. Per aconseguir-ho, he introduït mitjançant knock-in un tag de degradació al gen HAUS6, cosa que permet la inactivació específica d'augmin durant la interfase, en absència de defectes mitòtics. Utilitzant aquest model, vaig trobar que els centríols fills naixents que no tenen augmin al lumen presenten defectes estructurals i romanen més curts que els controls, a causa d'una elongació defectuosa de la part central del cilindre centríolar, mentre que la part distal roman inalterada. Curiosament, γTuRC és reclutat per augmin al lumen del centríol, però només després de la mitosi, cosa que suggereix que no hi ha una implicació directa de γTuRC luminal en la biogènesi del centríol. També vaig analitzar l'activitat de nucleació de microtúbuls en interfase, que sembla que no es veu gaire afectada per la pèrdua d'augmin. Sorprenentment, després de l'eliminació dels centrosomes, la nucleació en interfase esdevé dependent d'augmin. Proposem que, a més de la seva funció mitòtica ben establerta, durant la interfase augmin assegura la biogènesi correcta del centríol i promou la nucleació de microtúbuls, en particular en cèl·lules amb activitat atenuada del centrosoma.
[esp] Augmin media la nucleación por ramificación de microtúbulos a través del reclutamiento del nucleador γTuRC a la pared de los microtúbulos para generar otros nuevos. A través de este mecanismo, augmin no solo amplifica el número de microtúbulos, sino que también refuerza la polaridad de los microtúbulos preexistentes, lo cual es vital para el ensamblaje del huso mitótico. Trabajos previos también han demostrado funciones no mitóticas de augmin, por ejemplo, en células vegetales durante la interfase y en neuronas postmitóticas. Además, nuestro grupo descubrió recientemente un nuevo papel en el lumen del centriolo, donde augmin es reclutado durante la fase S. En este contexto, en lugar de mediar la nucleación por ramificación, augmin podría promover la integridad del centriolo. En esta tesis, mi objetivo es obtener una mayor comprensión de las funciones no mitóticas de augmin. Para lograrlo, he introducido mediante knock-in una etiqueta de degradación en el gen HAUS6, lo que permite la inactivación específica de augmin durante la interfase, en ausencia de defectos mitóticos. Utilizando este modelo, he descubierto que los centriolos hijos nacientes que carecen de augmin en el lumen muestran defectos estructurales y son más cortos que los centriolos control, debido a una elongación defectuosa de la parte central del centriolo, mientras que la parte distal no se ve afectada. Curiosamente, γTuRC es reclutado por augmin al lumen del centriolo, pero solo después de la mitosis, lo que sugiere que no hay una implicación directa del γTuRC luminal en la biogénesis del centriolo. También he analizado la actividad de nucleación de microtúbulos durante la interfase, que parece no verse afectada en gran medida por la pérdida de augmin. Sorprendentemente, tras la eliminación de los centrosomas, la nucleación en interfase se vuelve dependiente de augmin. En esta tesis propongo que, además de su función mitótica bien establecida, durante la interfase augmin asegura la biogénesis correcta del centriolo y promueve la nucleación de microtúbulos, en particular en células con una actividad atenuada del centrosoma.
Recurs relacionat
Matèries
Matèries (anglès)
Citació
Citació
FARIÑA MOSQUERA, Marcos. Exploring Non-Canonical Roles of the Branching Microtubule Nucleator Augmin. [consulted: 27 of October of 2026]. Available at: https://hdl.handle.net/2445/230433