Development of cellular microarrays for stem cell culture and early stage differentiation evaluation

Abstract

[spa] El desarrollo de microambientales artificiales ordenados en un formato de microarray (microarrays celulares, también conocidos en inglés como "cellular microarrays") se ha propuesto como una herramienta que permite el análisis a gran escala de combinaciones de factores que afectan la diferenciación de células madre. Este novedoso acercamiento puede implementarse para imitar superficies planas y de esta forma estudiar su diferenciación, este fin tiene directas implicaciones en el desarrollo de nuevos biomateriales y en ingeniería de tejidos.

El objetivo general del presente trabajo de tesis consistió en el diseño y evaluación de microarrays celulares construidos con células madre con el objetivo de estudiar su diferenciación hacia osteoblastos (células óseas) en función de los factores impresos. A estos fines, se utilizó una trazadora de microarrays (microarray plotter) para realizar los microarrays donde diversos factores inmovilizados en micro islas impresas sobre substratos activados químicamente (vidrio y polimetilmetacrilato (PMMA), entre otros). Sobre estos substratos impresos se cultivaron células por períodos de 1 a 8 días y se evaluó su diferenciación al cabo de este tiempo de cultivo.

En la presente tesis se hizo una comparación de substratos en función de la cantidad de proteína impresa que retienen inmovilizada en su superficie. Otro objetivo consistió en optimizar los parámetros para la formación del microarray celular (tales como tiempo y concentración de sembrado de células, medio de cultivo, etc..). Finalmente se evaluó la diferenciación de una línea celular hacia osteoblastos en función de la presencia o no de un factor de crecimiento inmovilizado en las islas de microarray.