Desarrollo de metodologías citómicas avanzadas aplicadas al diagnóstico de hemopatías

Abstract

[spa] El objetivo principal de esta Tesis es demostrar el potencial de la citometría de flujo para la transferencia del laboratorio de investigación a la clínica, que se encuentra a diferentes niveles: el primer nivel es metodológico, especialmente mediante los métodos de mínima manipulación de la muestra. En el segundo nivel se encuentra la adaptación de otras técnicas a la citometría de flujo. En el tercer nivel se demuestran las ventajas de la implementación de tecnologías en pruebas clínicas. Y, en el cuarto nivel la validación de nuevas herramientas diagnósticas para el diagnóstico de enfermedades hematológicas y del sistema inmunitario. Para demostrar los diferentes niveles de transferencia de la citometría de flujo, se han realizado cuatro estudios con objetivos concretos: Del primer estudio: Demostrar las ventajas y aplicabilidad de metodologías que permiten la mínima manipulación posible de las muestras biológicas y sus ventajas para identificar células patológicas. Del segundo estudio: Aplicar la transferencia de la citometría de flujo sobre el método citoquímico de la determinación de la actividad fosfatasa alcalina granulocitaria, mediante la mínima manipulación de las muestras para detectar dicha actividad en su estado nativo a nivel celular. Del tercer estudio: Demostrar que la determinación de progenitores hematopoyéticos CD34+ puede realizarse con mayor precisión gracias a la utilización de sistemas volumétricos reales y excitación con láseres de 561 nm como estrategia de implementación de las recomendaciones ISHAGE. Del cuarto estudio: Otorgar la acreditación CE-IVD a una larga serie de anticuerpos monoclonales para su posterior utilización en procedimientos de diagnóstico clínico.