Carregant...
Fitxers
Tipus de document
TesiVersió
Versió publicadaData de publicació
Si us plau utilitzeu sempre aquest identificador per citar o enllaçar aquest document: https://hdl.handle.net/2445/36016
Paper de la molècula adaptadora 3BP2 en la senyalització dels receptors leucocitaris de la família del CD150
Títol de la revista
Autors
Director/Tutor
ISSN de la revista
Títol del volum
Resum
[cat] La família del CD150, està formada per receptors de la superfamília de les immunoglobulines, expressats en la membrana de cèl·lules del sistema immune. Es caracteritzen per compartir una elevada homologia estructural i localitzar en la mateixa posició 23 del braç llarg del cromosoma 1. Els membres de la família CD84, CD150, CD229, CD244, CD319 i NTB-A presenten una regió intracel·lular amb, com a mínim, un motiu tirosina del tipus T-V/I-Y-XX-V/I. Aquest és el motiu consens d'unió d'una família de molècules adaptadores anomenades SAP i EAT-2. En humans, deficiències en SAP, són responsables d'una immunodeficiència primària lligada al cromosoma X, caracteritzada per una extrema susceptibilitat al virus de l'Epstein-Barr, amb mononucleosi infecciosa fulminant. L'objectiu d'aquesta tesi ha estat identificar nous lligands intracel·lulars pel receptor CD244 i poder així, comprendre millor les funcions derivades de l'activació d'aquest membre de la família. L'activació del CD244 (o 2B4) comporta una activació de la citotoxicitat i increment de la producció de l'IFN-gamma de les cèl·lules NK i limfòcits T citotòxics CD8+. Mitjançant la tècnica del triple híbrid en llevats, hem trobat que la molècula 3BP2 interacciona directament ambla regió intracel·lular el CD244 en condicions de fosforilació. El 3BP2 és una molècula adaptadora d'expressió preferent en el cèl·lules de llinatge hematopoètic, que sense tenir cap activitat catalítica, té la capacitat de reclutar diferents proteïnes, formant un signalosoma i participant positivament en l'activació de cèl·lules hematopoiètiques. En humans, mutacions puntuals en el 3BP2, són responsables d'una malaltia autosòmica dominant anomenada querubisme, caracteritzada per una degradació dels ossos de les maxil·les, relacionat amb una disfunció dels osteoclasts. El primer objectiu de la tesi, va ser verificar i caracteritzar la interacció entre el receptor CD244 i l'adaptador 3BP2 en cèl·lules humanes de NK. En condicions d'activació, es detectà interacció (coprecipitació i col·localització) entre ambdues proteïnes en la línia de cèl·lules NK,YT, en la què hem sobreexpressat el 3BP2 en pauta amb la proteïna verda fluorescent (EGFP). Aquesta interacció també la detectem en cèl·lules humanes de NK obtingudes de sang perifèrica seguint un protocol d'enriquiment, selecció i expansió amb IL-2. En aquest cas i per tal de detectar la proteïna endògena del 3BP2, fos necessària la producció d'un anticòs monoclonal seguint un protocol de immunització de ratolins amb un pèptid del 3BP2. Seguidament passàrem a caracteritzar les vies de senyalització i respostes funcionals de l'activació del CD244 en un context d'implicació del 3BP2. Demostrem que el 3BP2 està afectant i potenciant la via d'ERK i la capacitat lítica de la cèl·lula NK. En canvi, ni l'activitat de la p38 ni la producció d'IFN-gamma es veuen alterades per la presència o absència del 3BP2. Proposem el 3BP2 com a la molècula que dicta la dicotomia de la resposta de la cèl·lula NK. També analitzàrem la interacció directe del 3BP2 amb els altres membres de la família del CD150, mitjançant al tècnica del triple híbrid. Trobàrem que la regió intracel·lular del receptor CD229 (o Ly9) interacciona directament amb el 3BP2 en condicions de fosforilació. S'ha descrit que el CD229 juga un paper atenuador en l'activació del TCR de la via d'ERK i del factor de transcripció NFAT en el limfòcit T. Els estudis realitzats en aquesta tesis, indiquen que el 3BP2 potencia la inhibició del CD229 mediada sobre l'activació del TCR. Aquesta tesis ha caracteritzat la importància bioquímica i funcional de la molècula adaptadora 3BP2 en la senyalització de dos receptors de la família del CD150. Per una banda, al interaccionar amb el CD244 potencia la capacitat lítica de la cèl·lula NK. Per l'altra, a l'associar-se amb el CD229, l'adaptador 3BP2 incrementa l'atenuació de l'activació del limfòcit T. Per tant, en funció les parelles d'unió que estableix durant l'activació d'aquests receptors, el 3BP2 pot jugar un paper positiu o negatiu en la resposta d'aquests dos tipus cel·lulars.
Descripció
Matèries (anglès)
Citació
Citació
SABORIT VILLARROYA, Ifigènia. Paper de la molècula adaptadora 3BP2 en la senyalització dels receptors leucocitaris de la família del CD150. [consulta: 5 de desembre de 2025]. [Disponible a: https://hdl.handle.net/2445/36016]